Das Land Berlin unterhält Städtepartnerschaften mit Brüssel, Budapest, Buenos Aires, Istanbul, Jakarta, Los Angeles, Madrid, Mexiko-Stadt, Moskau, Paris, Peking, Prag, Taschkent, Tokio, Warschau und Windhuk. Daneben gibt es gemeinsame Projekte mit Damaskus, Jerusalem, Kuwait-Stadt, Schanghai, Seoul und Sofia und die Beteiligung an Veranstaltungen internationaler Städteverbindungen und -vereinigungen. Mehr als 90 zusätzliche Städteverbindungen werden von den Bezirken betreut.

Diese Partnerschaften dienen dem gegenseitigen Erfahrungsaustausch, der Beratung bei Reformprojekten und der Vermittlung politischer, kultureller und wirtschafts- und sozialpolitischer Informationen. Neben kulturellen Veranstaltungen wie Ausstellungen, Musik-, Tanz- und Theatergastspielen werden zum Beispiel Stadt- und Wirtschaftspräsentationen, Seminare zur Aus- und Fortbildung von Fach- und Führungskräften, Studienaufenthalte und Jugendaustausch-Programme gefördert. Kooperiert wird dabei nicht nur zwischen Behörden, sondern auch zwischen politischen und gesellschaftlichen Gruppen wie Parteien, Gewerkschaften, Industrie- und Handelskammern, Kirchen und Glaubensgemeinschaften sowie Stiftungen.

Die Hauptstädte der Europäischen Union stehen im Vordergrund der partnerschaftlichen Beziehungen. Auch die günstige Lage Berlins zu Mittel- und Osteuropa nutzt beiden Seiten zunehmend. Die Partnerschaft mit Los Angeles und weiteren kulturellen und wissenschaftlichen Institutionen in den Vereinigten Staaten bleiben unverzichtbarer Bestandteil der Auslandsaktivitäten Berlins. Unterschiedliche Schwerpunkte in der Zusammenarbeit ergeben sich mit Metropolen und Hauptstädten in der Dritten Welt: So haben wirtschaftliche, technologische und ökologische Aspekte Priorität bei der Zusammenarbeit mit Städten in Lateinamerika, während der Dialog mit den Partnern der Asien-Pazifik-Region vor allem über kulturelle, wirtschaftliche und wissenschaftliche Fragen geführt wird. Im Austausch mit afrikanischen Metropolen interessieren hauptsächlich Themen der städtischen Infrastruktur (Personennahverkehr, Abfallentsorgung, Wasserver- und -entsorgung) und des Tourismus.